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April 24,2008

沒有使用PVP的顯微精蟲注射

高雄長庚醫院婦產部 蔡孟穎醫師


顯微精蟲注射發展迄今已愈十年。全世界大多數的生殖醫學中心,現在都已有能力執行此項技術。施行此項技術時,為了便於吸取游移中的精蟲,絕大部份的中心都會使用polyvinylpyrrolidone(PVP)來減緩精蟲的活動速度。

PVP是一種合成的多聚合物。它長期以來已被廣泛的使用於各項生殖科技。它可以做為冰凍胚胎時的冷凍保護劑,同時也被使用於精蟲的洗滌。在顯微精蟲注射的過程中,分子量360,000的PVP常被使用來減緩精蟲的活動速度。隨著精蟲被打入卵細胞質內,少量的PVP溶液也同時不可避免地被注射入卵中。也因此,PVP的安全性近幾年被廣泛地討論。

有關PVP對胚胎的影響,文獻上顯示的結果仍相當分歧。從鼠胚的研究顯示PVP對鼠胚的發育有害。但同一實驗在牛胚中則顯示並無不良影響。1998年,在一篇對人類精蟲所做的研究指出,PVP會影響精蟲的粒腺體、細胞膜;且因為細胞膜的破壞而進一步造成染色體及微細管的受損。由於這些莫衷一是的報告,使得我們對PVP的安全性一直無法建立完全的信心。也因此,有些中心嘗試著不使用PVP去執行顯微精蟲注射。截至目前為止,大大小小共有五篇沒有使用PVP行顯微精蟲注射的報告,其中較嚴謹而令人注目的有兩篇。一篇是捷克格林卡等人的報告,另一篇則是高雄長庚的報告。兩篇都是案例-控制組研究。格林卡等人的研究是將同一病人取出的卵分成兩組,分別施行使用PVP與不使用PVP的顯微精蟲注射。而高雄長庚則是在同一段時間內,將病人分成兩組,一組施行含PVP的顯微精蟲注射,另一組則不含。如此比較兩組的結果,兩個研究均顯示,不使用PVP這一組,其受精率有意義地高於使用PVP的這一組。至於懷孕後,格林卡的研究由於是兩種方式施行於同一病人,故無法比較;但高雄長庚的報告則顯示並無差別。

前已提及,PVP的好處在於減低精蟲的活動速度,便於操作。如果不使用PVP相對的一定會增加操作的困難度。但前述幾篇,尤其是捷克及高雄長庚的例子已明顯地顯示,這樣的困難並非不可克服。由於牽涉到下一代許多人的健康,顯微精蟲注射的施行,應以最高安全為原則。


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April 17,2008

雷射助孕 不孕婦女添生機----中國時報報導

【林倖妃/高縣報導】

為圓不孕婦女的千禧夢,高雄長庚醫院人工生殖中心引進雷射技術,配合囊胚期培育,大幅增加胚胎植入母體內自然孵化,在子宮著床機率,整體受孕率高達四成,再創新猷七成六,其中一名四十二歲婦女歷經南北奔波,經過九次人工受孕,終於在高雄長庚受孕成功。

美國採行人工生殖平均受孕率約為百分之三十五到四十左右,國內數據亦在百分之三十五之譜,高雄長庚醫院人工生殖中心昨天發表數據,八十八年平均在該院接受人工生殖技術的不孕婦女,超過四成成功受率。

長庚生殖醫學科主治醫師黃富仁表示,以人工授精方式取得胚胎,受孕失敗主要原因除胚胎本身品質不佳外,通常是因胚胎植入母體後,外圍原具保護作用的透明帶,無法適時孵化破裂,反而形成阻隔,讓胚胎在子宮內難以自然著床所造成。

人工生殖中心去年引進雷射技術,胚胎培養第三天,以雷射的準確度並控制深度,事先將胚胎透明帶削薄,部分更持續在體外培育到囊胚期,選擇品質較優、生命力較強胚胎植入母體,去年八月首度出現成功受孕個案。

黃富仁指出,該中心使用雷射技術在十一月趨於穩定成熟,全方位運用針對高齡、接受多次試管嬰兒失敗及因胚胎透明帶過厚無法受孕婦女,從最近兩個月統計發現,整體受孕率從四成大幅攀升到七成六,受孕婦女中有七成三的胚胎曾經接受使用雷射,五成六五合併囊胚期培育,不少婦女獲知懷孕消息欣喜若狂。

受惠婦女中,最高齡為四十二歲的國小老師,在連生三個女兒後停止懷孕長達近九年,想生個兒子卻因高齡難以受孕,到南北各大醫學中心不孕症中心求診,進行試管嬰兒技術高達九次,花費不止上百萬元,在長庚以雷射及囊胚期培育增加受孕機率,目前已懷孕五個月。

黃富仁說明,受孕技術獲得再度突破,令醫師精神為之一振,今年將以整體受孕提高到五成為目標。至於仍有婦女失望而歸,分析主要為本身子宮環境不佳,罹患子宮內膜異位、子宮肌瘤等相關疾病,但年齡過大,導致卵子品質太差,才是想求得一子婦女的最大敵人。

【林倖紀/高雄報導】一名婦女羅患罕見子宮肌腺瘤,內膜侵犯到子宮壁造成肥厚,約為正常婦女子宮一倍大,深受劇烈經痛及經血量過多之苦,婚後求子心切卻無法如願,經高雄長庚醫院治療並施予人工受孕,十日發現胚胎成功著床,證實懷有三胞胎,連醫師都大感意外。

黃富仁指出,由於胚胎並非處於優良狀況,且患者子宮受孕環境過差,預期並不理想,但患者昨天到院檢查,赫然發現所植入三胚胎均成功著床,連醫師本身都頻呼意外,但根據以往經驗,該院曾有一例同樣罹患子宮肌腺瘤,經由人工受孕成功,卻在懷胎五月時,因不明原因劇痛,止痛安胎無效後流產,對此一病例將密切觀察。


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April 12,2008

不孕症 會不會遺傳?----Y染色體有缺陷的無精症患者會傳給子代

高雄長庚醫院 蔡孟穎 婦產部不孕症醫師

學生:「老師,請問不孕症會不會遺傳?」老師:「※#○□……。」

這是筆者學生時代寫在班上共同筆記的一則幽默,乍聽之下,似乎是很無厘頭的,因為既然是不孕,自然就沒有小孩;而不會生育,當然也就無所謂遺傳的問題,這樣的推理應該是千古不變的基本邏輯。很不幸,在這不確定的年代裡,隨著遺傳與生殖科技一日千里的進步,基本邏輯似乎也禁不起時代的考驗了。

話說男人,其實是命苦的,在還是一隻小小的精蟲時就是了。為了達成繼起宇宙生命的神聖使命,小精蟲必須過五關斬六將,歷經長征,最終只有一隻得以與卵子結合,其他數千萬隻,不過是為人作嫁而已。在這過程中,「精」海戰術是絕對需要的,跑太慢的固然注定被淘汰,數目不夠、缺少夥伴支援的,也絕對撐不到終點。所以精蟲的世界,其實也是「既聯合又競爭」的世界。而這些聯合者到底有多少呢?根據世界衛生組織的標準,每c.c.至少要有兩千萬隻。

糟糕的是,有些男人硬是無法達到這個標準,傳統上(所謂傳統,也不過二十年而已),我們可以人工受孕或試管嬰兒的方式使之受孕,不過這也必須達到低標才可以,那些精蟲數少於每c.c.300萬隻的人,基本上是沒有「生」機的。

不過,這情況在1992年以後已經被顛覆了,這得歸功於細胞質內顯微精蟲注射技術的發展。這個技術是利用顯微操作方式,直接將一隻精蟲注射入卵細胞質內強迫受精,理論上,一顆卵子,只要一隻精蟲就夠了。所以即使是無精病的患者,只要睪丸切片能取到少數精蟲,即使是不完全成熟的幼齒精蟲,也一樣可以對號入座。然而如此一來,是不是所有問題都迎刃而解了呢?恐怕未必。

1995年底,麻省理工學院的一群科學家在男性的Y染色體上發了一個DAZ(Deletion in Azooxpermia)的基因,這個基因一發現,立刻在生殖醫學界掀起軒然大波,根據現有資料顯示,這個基因很可能和精蟲製造有關。在11%的無精症和3-20%(不同文獻,數據不同)的少精症患者,這個基因是闕如的,這還不包括以後可能發現的定點突變的患者,換包話說,也就是在一百個無精或少精症患者中,約有十人左右可能帶有這個基因的缺陷。

物競天澤,以前這些人是沒有「子」望的,可是現在顯微精蟲注射技術使他們重獲「生」機了。問題是,這些人的Y染色體是有缺陷的,如果他們生育,理論上他們的男性子代都將帶有和爸爸一樣缺陷的Y染色體;這些子代在長大後極有可能和爸爸一般,是無精症或少精症患者;如果他們要生育,代代都必須做顯微精蟲注射?而這些家庭在成長過程中又將要承受多少陰影?

不過往好的一面想,事情或許不會那麼糟。人類都已經到達火星,複製羊桃莉也都已經五歲了。隨著基因治療的進步,在下一個世代來臨之前,這些DNZ缺陷的病人,也許都可以透過基因治療而自製精蟲了。我們這一世代的擔心,或許不過是杞人憂天罷了!只是屆時父母親要問的,可能不是不孕會不會遺傳,而是經過基因治療後,我兒子到底還是不是我兒子!

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April 7,2008

輸卵管積水 影響試管嬰兒成功率

中國時報報導

不孕症婦女在門診接受醫師的評估時,輸卵管的通暢與否,是決定一位女性能否自然受孕的重要因素之一。輸卵管若因為發炎、子宮外孕、子宮內膜異位症、腹部手術後等等因素,內部蓄積液體,導致輸卵管阻塞膨脹如香腸狀,視之為輸卵管積水。

大部分的文獻顯示,因發炎所引起的輸卵管積水,使得試管嬰兒的懷孕率及著床率減低(約50%),使得流產率提高(約2倍)。至於非因發炎引起的輸卵管積水,則不被認為有負面影響。

雖然大部分的研究指顯示,因發炎引起的輸卵管積水對於試管嬰兒的成功率有負面的影響,但是如何正確處理這類不孕症婦女的輸卵管積水仍是臨床上一大挑戰。

有下列幾種方式可為參考:
1.內科療法:針對發炎是造成輸卵管積水的原因,給以抗生素治療,但效果有待進一步研究評估,目前並不是標準療法。

2.把輸卵管積水以陰道超音波或腹腔鏡等方式抽吸掉:有研究顯示在開始打排卵針前把積液抽掉,可獲得較好的卵巢反應,亦即有較多的卵子數及胚胎數,但究竟此步驟可否提高懷孕率,仍屬爭議的範圍,此方法亦沒有根本解決問題,積水仍會再生成。

3.在進行試管嬰兒療程前把積水竹旳輸卵管摘除:這部份亦屬有爭議性。既然大部分的研究顯示輸卵管積液對於試管嬰兒的懷孕率、著床率有不好的影響,有人主張乾脆把這些積水的輸卵管作預防性的切除。但是不適當或過當的輸卵管切除,反而可能影響卵巢的血流供應,進一步對試管嬰兒成功率有負面影響,所以切除輸卵管應該是輸卵管已經無可救藥時,才要考慮如此手術。

4.手術(如腹腔鏡)將輸卵管與子宮交接處封死,不讓有害的積水流至子宮腔,並且把輸卵管積液引流至腹腔。這是當輸卵管積水已經導致相當嚴重輸卵管病變,可是又擔心切除輸卵管會傷害卵巢功能,或者是因為骨盆腔沾黏使得切除輸卵管有困難時,可以採用這種手術。

5.輸卵管整形手術。當輸卵管積水不是很嚴重(管徑腫脹小於3公分),輸卵管內膜破壞較輕微(沒有管腔內沾黏),管壁未硬化,外壁也沒有嚴重沾黏,可以施行輸卵管整形手術,讓管內積液流至腹腔內,並且使輸卵管通暢,如此不僅可以提高試管嬰兒成功率,也可以有機會自然受孕。

輸卵管積水有多種不同的病因與病變程度,對試管嬰兒技術成功率也因而有不同的影響。「輸卵管和試管嬰兒沒有關係」,這句過去常說的話,應該加以拋棄了。唯有針對不同的積水情形,作不同的治療,之後再施行試管嬰兒技術,才能得到最好的試管嬰兒懷孕率。(作者藍國忠為高雄長庚紀念醫院婦產科系醫師)


Posted by icsiivf at 10:12回應(0)引用(0)輸卵管因素之不孕症

April 2,2008

生殖實驗室札記

高雄長庚醫院人工生殖中心 林姿妤 曾雅容 林易奇

不孕夫妻的甘與苦
「不孝有三,無後為大」的舊思維在老一輩的觀念裡,重責仍舊落在女人的身上。記得大約在兩三年前吧,有位婦女一進實驗室劈頭就頭:「小姐,妳們這裡做試管嬰兒的成功率有多少?我婆婆說如果我再不能出生一個兒子傳宗接代,就強迫我先生和我離婚。」看她這麼激動的訴說著自己的遭遇,可以感受到她對失敗的恐懼,原以為這種情節在現今的社會中,只有電視上才看得到,沒想到活生生的例子就出現在我眼前。

當然,相對的也有較溫馨感人的例子,在我印象中,有對夫妻嘗試不孕症治療長達八、九年之久,不孕的陰影一直籠罩著他們夫妻倆。在治療不孕的這段期間撇開他們所花費的金錢不談,加諸在他們身上的壓力,身心所受的煎熬,經歷一次又一次的希望與失望,想必不是一般人皆可體會得到的。其實值得一提的是他倆的相知相惜,記得有次先生獨自跑來說要解除冷凍精子的合約,我心想他花了那麼多時間和金錢儲存的精子為何要放棄,他說原因只有一個,就是覺得太太太辛苦了,嘗試那麼多次的人工授精與試管嬰兒,受了不少折磨,身體也因此變得越來越差,所以他打算放棄,不忍心太太再受苦了。但即使嘗盡了前面失敗的滋味,經過一段沉寂,太太重新建立希望,仍毅然決然地願意再試試看,為的只是不想讓他們夫妻間存有遺憾。「皇天不負苦心人」,患者終於懷孕了,在今年生下了一個女寶寶,對於這得之不易的新生命,他們夫妻倆如獲至寶。很多不孕夫妻歷經遍訪名醫,包括中醫、西醫或其他另類醫療經多方嘗試,甚至求神問卦,仍無法順利懷孕時,往往試管嬰兒治療是他們最後的選擇,我們醫院的張醫師曾說過,病人要懷孕醫師占三分之一,實驗室占三分之一,其他三分之一就交給上帝了。

胎胎實驗室的甘與苦
取卵當日一大早就得進入我們位於兒童醫院5樓開刀房的胚胎實驗室,開刀房的護士也顯得非常忙碌的準備取卵作業所需的器材。病人早已麻醉了,前置作業完成後取卵隨即展開。在燈光昏暗中陪伴著我們的聲音是抽取馬達呼呼作響(此時被開刀房小姐戲稱是最有氣氛的房間),一支支混有濾泡液血水的試管經由胚胎實驗室和手術室間連結的轉送窗口送了進來。解剖顯微鏡下,一團團的含卵子的細胞團(oocyte-cumulus-corona complexes)在紅色的血水中顯得異常的晶瑩剔透。這些細胞團在含有分解酶的緩衝液中去除外層的細胞團,使卵裸露出來以後我們就可看到出現第一極體的成熟卵子,有了它讓我們感受到無窮的壓力與責任,有了它也讓我們想到醫院的黃醫師說話的話,胚胎的好或壞就在這一顆卵子的最原始的成熟度,它的成熟度雖然在離開母體就已經決定了,但隨後在體外所培養出胚胎的生命力就掌握在我們的手中!想著想著握試管的手就越來越緊。

作ICSI時一樣在燈光黯淡氣氛佳之下進行,在蔡司倒立顯微鏡(DIC影像系統)和Eppendorf電動顯微操作儀搭配下操作,用Injection pipette壓精子尾部,精子被此動後吸入精子,Holding pipette固定卵子,使第一極體位於6或12點鐘方位,吸入精子的injection pipette從3點鐘方位刺入卵子,並回抽確認卵膜已經破裂後,即時注入精子,動作一氣呵成,忙碌緊湊就是為了將卵子在培養箱外操作時間減到最少,才能將傷害減至最低,得到最好的胚胎。雖然已經在極短時間內完成任務,心中仍惦記著明天它們的結果會是什麼。

已注射的卵子移入胚胎培養液洗滌3次後,在37℃/6%的CO2培養箱中培養,ICSI注射授精16小時後,礭定形成受精卵後,再將它培養至第五天時,順利看到它們發育成囊胚期胚胎時心情為之振奮。因為它幾乎可說是一個胎兒的原始雛形,一個新生命的誕生越來越近了!

Posted by icsiivf at 9:13回應(0)引用(0)實驗室相關
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