August 1,2009

原來我們資訊這麼先進

經別人一說,發現我在bbs的文章超過500篇(576!)
所以就想看看我過去到底寫了些啥東西阿

然後我在以前的班版看到吳了學長在2001年的文章
標題 Re: (轉貼)普微實習通告
時間 Fri Mar 2 11:59:49 2001
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這周的作業己經公佈在討論區內.
沒事看看,有事寫寫...

140.120.200.152首頁有個google這個單字,那可是全世界最快的搜x引擎的超連結位址
用6000台linux做成cluster的超級伺服器的喔!!
到那找答案....很快的咧!!!!

也就是說呢2001年的時候,吳了學長就教導我們google了
那時google紅了嗎?應該還沒吧
哎呀,如果那時就知道去買個google股票就好:p

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順便複習一下吧

抽DNA的方法
1. 取4.5ml菌液,離心9Kg,10分鐘。去除上清液。重覆約2次。
2. 沉澱以200μl STE buffer 振盪清洗約2次,離心9Kg,10分鐘。
3. 沉澱溶於400μl STE buffer。
4. 加入80μl之10% SDS,65℃ 水浴,30分鐘。
5. 加入5μl 之proteinase K ( 20 mg mL-1 ),37℃ 水浴,4小時。
6. 加入400μl STE buffer,搖動使均勻混合。
7. 加入等量之phenol搖動使均勻混合,離心12000rpm,5分鐘。同法依序以phenol\
,phenol/chloroform,chloroform萃取純化2-3次。(吸取上層液時要用大頭tip)
8. 加入10μl 之RNase A(1 mg mL-1),37℃ 水浴,1小時。
9. phenol/chloroform 萃取純化2-3次。
10. 加入總體積之1倍95% isopropanl (-20℃),搖動至均勻混合。(應可見DNA懸浮)
11. 離心15000g,10分鐘。
12. 以 75% 酒精rinse清洗DNA 2次。
13. 靜置至酒精揮發。
14. 將DNA溶於ddH2O。

STE buffer : 10mM Tris-HCl (pH 8.0),100mM NaCl
(可先配1M Tris-HCl,0.5M EDTA,5M NaCl再稀釋)

Posted by dichawang at 樂多Roodo! │03:33 │回應(1)引用(0)Mots 文字
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回應文章

我那時候好喜歡phenol這個詞喔
唸起來就很專業 很神秘
不過它是揮發性液體,會致癌,會死人(學長交待的)
所以要在抽風櫃裡操作
Posted by Dicha at August 10,2009 04:45